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风骚老妈 一文空洞间充质干细胞(MSC)的三系分化过甚培养Protocol|卵白|基质|骨细胞|体细胞

发布日期:2024-10-08 14:13    点击次数:139

风骚老妈 一文空洞间充质干细胞(MSC)的三系分化过甚培养Protocol|卵白|基质|骨细胞|体细胞

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风骚老妈

间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cell,MSC)具有私有的生物学脾气和调整潜能,正在成为疾病探讨限度的“新星”,探讨热度捏续不减。MSC触及有关探讨较多,如多发性硬化症、要道炎、精神病感性心事、肠说念疾病等,是移植和本人免疫系统疾病限度的探讨热门。

2014-2024年MSC限度发表论文数目统计,数据来自Pubmed

间充质干细胞 (MSC) 是源自中胚层的具有高度自我更新、多谱系分化后劲的多颖慧细胞,闲居存在于全身多种组织,具有易分离、易取得的优点,可在体外进行分化扩增培养。

MSC是肿瘤调整及基因传递探讨、功能基因组学、药物筛选、高通量筛选和毒理学的优秀器具。外洋细胞调整协会(ISCT)将东说念主源MSC界说为:

在步调培养条目下,为贴壁助长;

需抒发CD105、CD73和CD90,不抒发CD45、CD34、CD14或CD11b、CD79α或CD19及HLA-DR名义符号;

在体外不错分化为成骨细胞、成软骨细胞和脂肪细胞。

间充质干细胞来自多种细胞或组织,如骨髓、脂肪组织、外周血、胎盘组织、牙髓等。一样MSC也不错分化成多种细胞类型,如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌细胞、神经细胞、基质细胞等。

MSC起首及分化(源自参考文件)

值得防御的是,间充质干细胞的分化后劲可能会因干细胞起首、扩增条目过甚培养微环境而异。其中三系分化是MSC培养扩增的重心。三系分化时时指成骨、成脂和成软骨分化。为了更好地意会MSC的三系分化,本文初步追思了MSC三系分化的好像经过以及一些标识物对应的武断智商。

成骨分化

MSC在多种细胞因子的刺激过甚他脾气理化环境中,不错定向分化为骨原细胞。然后骨原细胞进一步分化成骨细胞前体细胞,参加快速增殖期。成骨细胞在此阶段合成和分泌有机基质,变成类骨质(主要为I型胶原卵白),特征物是碱性磷酸酶,是成骨细胞分化熟练的早期标识;碱性磷酸酶经固蓝染色后在显微镜下呈现蓝色,未分化的细胞则无显露神态。

熟练的成骨细胞抒发ECM钙化有关卵白。永劫辰的成骨教唆使钙离子以钙盐形势千里淀下来,变成“骨结节”。骨结节可通过茜素红染色(茜素红和钙发生显色响应,产生一种深红色化合物),把外面千里积的钙结节染成深红色,通过着色物面积和浅深来示意成骨分化的强弱。

不同起首的MSC成骨分化武断

成软骨分化

当先MSC蚁集成团,成团的中间细胞经分裂分化改造成一种大而圆的细胞,即成软骨细胞。成软骨细胞产生基质和纤维(主要为 II型胶原卵白) ,通过免疫组化不雅察II型胶原卵白的抒发情况。

一般用阿利新蓝武断成软骨细胞分化成果。阿利新蓝属于碱性染料,不错与细胞内的核酸商量,使细胞核呈深蓝色。同期,阿利新蓝与软骨基质中的多糖商量,使软骨细胞和基质呈浅蓝色。

不同起首的MSC成软骨分化武断

成脂分化

MSC成脂分化有两个阶段,先是分化为脂肪前体细胞,接着在特定刺激影响下(如C/EBPs和PPAR-γ)分化为脂肪细胞。

细胞在胞浆中束缚聚积脂肪滴,并束缚变大。诈骗油红O染色后,在显微镜下为红色。未分化的细胞则无显露神态。

不同起首的MSC成软骨分化武断

多样要素王人会影响分化后劲。如培养环境、助长因子以过甚他细胞的存在,王人会影响分化经过。特定的信号分子,举例骨样子发生卵白(BMP)或Wingless有关整合位点(Wnt),不错分离促进干细胞分化为骨细胞或神经细胞。

间充质干细胞 探讨这样火热,义翘神州整理了一份详备的MSC操作指南。Protocol干货满满,除了以上三系分化武断示例,还包括间充质干细胞若何分离、若何传代扩增,以及若何判定扩增后的细胞即是间充质干细胞。见谅大师下载学习!

MSC分化与培养操作指南-义翘神州(点击发送到邮箱)

点击上方衔接,即可下载Protocol

参考文件 :

Dragomirka Jovic. A Brief Overview of Global Trends in MSC-Based Cell Therapy. Stem Cell Reviews and Reports, 2022. https://doi.org/10.1007/s12015-022-10369-1

Xing Liang Fan, et al. Mechanisms underlying the protective effects of mesenchymal stem cell-based therapy. Cellular and Molecular Life Sciences, 2020. https://doi.org/10.1007/s00018-020-03454-6

Yu Han, et al. Mesenchymal Stem Cells for Regenerative Medicine. Cells, 2019. doi:10.3390/cells8080886

Tilotta V风骚老妈, et al. Mesenchymal stem cell-derived secretome enhances nucleus pulposus cell metabolism and modulates extracellular matrix gene expression in vitro. Front. Bioeng. Biotechnol. 2023. doi: 10.3389/fbioe.2023.1152207








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